W poniższych badaniach, rygorystycznie badaliśmy rolę VAMP8 w każdym z exocytotycznych zdarzeń komórki trzustkowej trzustki w kontekście tego alkoholowego modelu zapalenia trzustki. Regulowane wydzielanie enzymów jest zmniejszone, ale nie usunięte w Vamp8. /. acini i jest dodatkowo redukowany przez wstępne traktowanie EtOH. Najpierw zbadano wpływ delecji VAMP8 na wydzielanie amylazy stymulowane przez Cch i EtOH. Jak wcześniej podano (15, 20), potwierdziliśmy brak białka VAMP8 w zdyspergowanym trzustkowym akcynie Vamp8a /. myszy (Figura 3A i analiza na uzupełniającej Figurze 1). Ponadto zwiększono ekspresję białka VAMP2, co jest zgodne ze wzrostem liczby ZG. Wcześniej wykazano, że h jest optymalnym czasem dla submaksymalnego Cch (3 (3M) w celu maksymalnego uwolnienia amylazy z rozproszonego trzustkowego trzustki, a h to minimalny czas preinkubacji z 20 mM EtOH, przed dodaniem 3. M Cch, w celu osiągnięcia maksymalnego hamowania 3. M wydzielania amylazy stymulowanej przez Cch (6, 7). EtOH 20 mM jest stężeniem znajdującym się w zakresie stężenia alkoholu we krwi obserwowanym podczas klinicznego zatrucia alkoholem (5) i naszego alkoholowego modelu zapalenia trzustki (Tabela 4), ale był niewystarczający, aby niezależnie stymulować wydzielanie amylazy (6. 8). W przypadku noworodków trzustki VAMP8 wykazano wyższą aktywność amylazy w porównaniu z normalnymi noworodkowymi trzustkami (15). Dlatego przeanalizowaliśmy to u dorosłych myszy z grup CD i ED, znajdując Vamp8. /. trzustki wykazują 2-krotny wzrost (P <0,05) w aktywności amylazy (w jednostkach arbitralnych, odpowiednio 2,1. 0,4 i 2,3. 0,4) w porównaniu z trzustkami WT (odpowiednio 1,0. 0,2 i 1,1. 0,2) (Figura 3B) . Figura 3C bada wydzielanie amylazy (wyrażonej jako procent całkowitej amylazy) WT i Vamp8. /. acini, które były lub nie były wcześniej traktowane 20 mM EtOH (1 h), w odpowiedzi na submaksymalną Cch (3 (3M), maksymalną (80 (M) i supramaksymalną (2 mM) stymulację (1 h). Przy braku wstępnej obróbki EtOH, regulowane uwalnianie amylazy było znacznie zmniejszone w Vamp8a /. acini w porównaniu z WT acini po stymulacji submaksymalnym (3 (3 M Cch, h, WT, 19,4% -1,6%, Vamp8a / p, 6,8%> 0,7%) i maksymalnym Cch (80 (x M Cch, godz; WT 31,2%, 2,2%, Vamp8a / P, 12,0%, 1,4%), co stanowi zmniejszenie odpowiednio o 65,0% i 62,2% (P <0,05). Te wyniki różnią się od naszych początkowych badań (15), które wykazały, że pobudzony sekrecją wydzielanie w Vamp8. /. Acini został w dużej mierze zniesiony. Wyższe poziomy podstawowej amylazy w poprzednim badaniu sugerują, że zastosowane preparaty trzustkowe i młodszy wiek myszy nie były optymalne, a zatem były znacznie mniej wrażliwe na stymulację niż poziomy podstawowej amylazy w bieżącym badaniu. Sam 20 20 sam EtOH nie stymulował znacznego uwalniania amylazy (WT, 2,2%. 0,9%, Vamp8a / p, 1,5% . 0,5%) w porównaniu z poziomami podstawowymi (kontrola Krebsa-Ringer-HEPES [KRH], WT, 2,0%. 0,7%, Vamp8a /, 1,4%, 0,6%). Zadziwiająco, acini z obu WT i Vamp8. /. myszy traktowane wstępnie 20 mM EtOH (1 godz.) znacznie zmniejszono uwalnianie 3 | jM i 80 | jM Cch o 40% . 50% (P <0,05). Aby pokazać, że wywołana sekrecja była wynikiem stymulacji Cch, preinkubacja acini z Atp (1.M Atp, h) blokowała wydzielanie amylazy stymulowane przez Cch i EtOH / Cch przez porównywalną redukcję o 49,2% i 50,7% w Myszy WT i 45,6% i 47,2% w Vamp8. /. myszy, odpowiednio (dane nie pokazane). Wiadomo, że supramaksymalne Cch powoduje hamowanie sekrecji, co w istocie miało miejsce w przypadku 2mM stymulowanego przez Cch uwalniania w WT (10,3%. 0,9%) i Vamp8. /. acini (3,6%, 0,7%). W przeciwieństwie do submaksymalnego i maksymalnego Cch, wstępne traktowanie EtOH nie spowodowało dalszego zahamowania sekrecji ze stymulowanego 2 mM Cch (odpowiednio 9,8% <0,8% i 3,5%> 0,6% w WT i Vamp8a / y). Figura 3 Ograniczone wydzielanie enzymu jest zmniejszone, ale nie usunięte w Vamp8a /. acini i wykazuje dalszą redukcję przy wstępnej obróbce alkoholem. (A) Western blot pokazujący, że VAMP8 jest nieobecny w Vamp8. /. mysią tkankę trzustki, podczas gdy poziomy VAMP2 są zwiększone. Białko (10 (ig) każdej frakcji rozdzielono na SDS-PAGE i poddano immunoblottingowi przeciwciałami przeciwko VAMP8, VAMP2 i aktyną. Reprezentant 3 niezależnych eksperymentów, n = 3 (analiza pokazana na suplementowej figurze 1). (B) Akumulacja amylazy w Vamp8. /. trzustki. Aktywność amylazy dorosłych WT i Vamp8. /. trzustki zostały określone i przedstawione jako jednostki arbitralne. Każda wartość jest średnia. SD z trzech próbek na eksperyment z 5 niezależnych doświadczeń (n = 15). * P <0,05 w porównaniu z myszami WT. (C) Wpływ 20 mM EtOH (1 godz. Preinkubacji) na submaksymalne (3. M, godz.), Maksymalne (80. M, godz.) I supramaksymalne (2 mM, godz.) Stymulowane Cch uwalnianie amylazy w WT i. Vamp8. /. acini [więcej w: erytrocyty w cytologii, tureckie allegro, dyslipidemia aterogenna ]
Random entries
Przypadek 22-1997 – 58-letnia kobieta z mnogimi neuropatiami czaszkowymi czesc 4
Często występują również osłabienia ołądkowo-gardłowe i językowe. Niewydolność oddechowa wystarczająco ciężka, aby wymagać wentylacji mechanicznej, obserwuje się w około 40 procentach przypadków.13-16 Występuje bardzo gwałtowne pogorszenie, z ciężkim osłabieniem rozwijającym… Read More Przypadek 22-1997 – 58-letnia kobieta z mnogimi neuropatiami czaszkowymi czesc 4
Przypadek 22-1997 – 58-letnia kobieta z mnogimi neuropatiami czaszkowymi ad 5
DevURLMogą wystąpić: opuchlizna, niedowład mięśni pozagałkowych, osłabienie twarzy, osłabienie gardła i niewydolność oddechowa. Jednak przebieg choroby wydaje się być podstępny. Nawet jeśli pogorszenie jest szybkie, zwykle nie jest tak gwałtowne,… Read More Przypadek 22-1997 – 58-letnia kobieta z mnogimi neuropatiami czaszkowymi ad 5
Tags
allegro pok
cysta naskórkowa
cystoskopia boli
cytologia płynna
czepota puszysta
czerniak złośliwy rokowania
czy psy mogą jeść czekoladę
dehydratacja krążków międzykręgowych leczenie
dieta wrzodowa jadłospis
dlaczego psy nie mogą jeść czekolady
dolargan ulotka
dom na przeklętym wzgórzu cda
dychawica krzyżówka
dyslipidemia aterogenna
dystymia test
embolizacja naczyniaka
erytrocyty w cytologii
hipertriglicerydemia
kot nie chce jeść
szpik w kości krzyżówka
tureckie allegro