VAMP8 to v-SNARE, który pośredniczy w egzocytozie podstawno-bocznej w mysim modelu alkoholowego zapalenia trzustki cd

Oryginalne powiększenie, × 40. Figura 2 Delecja VAMP8 zmniejsza ciężkość uszkodzenia płuc związanego z alkoholowym zapaleniem trzustki wywołanym przez ED plus stymulację Cch. Histologia tkanek płucnych. WT i Vamp8. /. myszy traktowano dokładnie tak, jak opisano na Figurze 1. Godne uwagi, grupa ED plus Cch wykazała infiltrację i krwotok leukocytów. Oryginalne powiększenie, × 40. Tabela Delecja VAMP8 zmniejsza nasilenie zapalenia trzustki indukowane przez ED plus stymulacja Cch Tabela 2 Delecja VAMP8 zmniejsza nasilenie uszkodzenia płuc związanego z alkoholowym zapaleniem trzustki wywołanym przez ED plus stymulacja Cch Następnie zbadaliśmy markery stanu zapalnego (trzustki i płuc) i wczesne tkanki obrażenia lub nekroza (tylko trzustka). Aktywność mieloperoksydazy i aktywacja NF-kB (p50 i p65) są doskonałymi markerami stanu zapalnego, które obserwowaliśmy w tkankach trzustkowych (tabela 3) i tkankach płucnych (tabela 2). Te parametry były poniżej wykrywalności w grupach z podawaniem CD i stały się wykrywalne w tkankach trzustkowych z grup traktowanych solą zasilaną ED (wyższe w WT niż myszy Vamp8a / (3). Gdy myszy karmione ED były leczone Cch, wszystkie te parametry wykazywały znacznie wyższy wzrost w grupie WT niż w Vamp8. /. grupy w tkankach trzustki i płuc, które korelują z naciekaniem leukocytów obserwowanym w histologii. Gdy myszy te były wcześniej leczone Atp, wszystkie te zmiany histologiczne i parametry zapalne tkanki wywołane przez ED plus leczenie Cch były blokowane lub zmniejszane. Tabela 3 Parametry tkankowe trzustki w ED z dodatkiem alkoholowego zapalenia trzustki wywołanego przez małe dawki Cch3 Peroksydacja lipidów jest ustalonym mechanizmem uszkodzenia komórek (26). Błony komórkowe są głównymi celami nadtlenków lipidów, co powoduje zmiany często związane z martwicą (26). W celu dalszej oceny stopnia uszkodzenia trzustki określiliśmy ilościowo poziomy trzustki 2 biomarkerów generowanych przez peroksydację lipidów, wodoronadtlenki lipidów i malonylodialdehydu (Tabela 3). Zarówno w WT i Vamp8. /. myszy, ED zwiększało poziomy tych biomarkerów w porównaniu z CD. Co ważne, wartości dla grupy ED plus Cch wykazały znacząco wyższe wartości u myszy WT w porównaniu z Vamp8. /. myszy. Ponieważ postuluje się, że aktywacja trypsynogenu acinowego jest mechanizmem alkoholowego zapalenia trzustki (27), zbadaliśmy aktywność trypsyny w tkankach trzustkowych (Tabela 3). Chociaż aktywność trypsyny była ogólnie nieco niższa we wszystkich Vamp8. /. w grupach, które uległy podobnej poprawie w grupach leczonych ED plus Cch (WT, 4,25. 0,36, Vamp8a / p, 3,89. 0,24 nM / mg DNA). To wskazywałoby, że Vamp8. /. acini zachował zdolność do aktywacji trypsynogenu, co prawdopodobnie przyczyniło się do łagodniejszego resztkowego zapalenia trzustki (27) w Vamp8. /. myszy. Następnie zbadaliśmy kliniczne parametry krążeniowe ostrego zapalenia trzustki (Tabela 4). Stężenie alkoholu w surowicy w grupach ED (myszy WT i Vamp8a / b) mieściło się w zakresie od 25 do 34 mM oznaczonych po 3 tygodniach i po uśmierceniu po 6 tygodniach, które są podobne do obserwowanych w zatruciu alkoholowym u ludzi (5) i tych stosowanych w naszym badania in vitro (6. 8). Poziomy amylazy w surowicy i lipazy u myszy karmionych CD i ED traktowanych solą fizjologiczną były podobnie niskie w WT i Vamp8a /. myszy. Te poziomy enzymów w surowicy były zwiększone u myszy traktowanych CD Cch, które były bardziej podwyższone w WT niż w Vamp8 (3 /. myszy. W grupach traktowanych ED Cch, myszy WT wykazywały ogromny wzrost poziomu amylazy w surowicy (~ 10-krotnie) i lipazy (~ 250-krotnie). Te poziomy były znacznie wyższe niż te w Vamp8. /. myszy, które wykazywały łagodny wzrost poziomu amylazy (~ 5,7 razy) i lipazy (~ 78-krotnie). Poziomy we krwi mediatorów zapalnych IL-6, TNF-a i białek indukujących makrofagi-1. (MIP-1 (3) wykryto w grupach z podawaniem ED i były one wyższe w WT w porównaniu z Vamp8. /. myszy (tabela 4). Te parametry ogólnoustrojowe wskazują, że ciężkość ostrego zapalenia trzustki w przebiegu choroby była znacznie łagodniejsza u Vamp8. /. myszy niż u myszy WT, ale nie została całkowicie zniesiona przez delecję VAMP8. Tabela 4 Parametry surowicy w ED z dodatkiem alkoholowego zapalenia trzustki wywołanego niskim dawkowaniem Cch Supramaksymalne zapalenie trzustki indukowane ceruleiną (patrz Metody) było klasycznym modelem zapalenia trzustki (1, 2). Korzystając z tego modelu choroby, obserwowaliśmy profile w tkankach trzustki i tkance płucnej oraz parametry surowicy w WT i Vamp8. /. myszy (Tabele Uzupełniające 1. 4), które były wyjątkowo podobne do leczenia ED plus Cch (patrz powyżej), przy czym Vamp8. /. u myszy rozwinęło się znacznie łagodniejsze zapalenie trzustki niż myszy WT. Ponieważ doniesiono, że VAMP8 pośredniczy bezpośrednio w egzocytozie w komórkach groniastych trzustki (15, 18, 20), zniesienie alkoholowego zapalenia trzustki przez delecję VAMP8 mogłoby wskazywać, że zdarzenia egzocytotyczne pośredniczone przez VAMP8 przyczyniają się do tej choroby
[hasła pokrewne: erytrocyty w cytologii, dychawica krzyżówka, czepota puszysta ]