VAMP8 to v-SNARE, który pośredniczy w egzocytozie podstawno-bocznej w mysim modelu alkoholowego zapalenia trzustki ad

Supramaximal CCK lub stymulacja Cch, powodując blokadę apikalną, pozostaje w pełni zdolna do promowania homotypowych fuzji ZG-ZG (14). Jednakże, który ZG SNARE (VAMP2 lub VAMP8) pośredniczy w fuzji błony w każdym z tych przedziałów pozostaje kontrowersyjny (10, 15). Początkowo proponowano VAMP2 jako domniemane ZG SNARE, ale całkowite odcięcie VAMP2 przez toksynę tężca spowodowało jedynie 30% zahamowanie wydzielania enzymu stymulowanego przez Ca2 + za pomocą permeabilizowanego testu acini (16, 17). Ostatnie badania z użyciem tego samego testu pokazały, że przeciwciała VAMP8 blokują wydzielanie enzymu Ca2 + i sugerują, że VAMP8 może być domniemaną regulowaną apatią zewnątrzpochodną ZG SNARE (18). Wcześniejsze doniesienia sugerowały rolę VAMP8 w homotypowej fuzji wczesnych i późnych endosomów (19), ale tego nie potwierdzono w raporcie dotyczącym delecji genu Vamp8 u myszy (15). Zamiast tego delecja Vamp8 spowodowała zahamowanie sekrecji stymulowanej agonistycznie, nie tylko w trzustkowych komórkach groniastych (15), ale także w innych tkankach zewnątrzwydzielniczych (20). Podczas gdy te raporty łącznie sugerują rolę Vamp8 w egzocytozie wierzchołkowej, delecja Vamp8 zniosła również supramaksymalne zapalenie trzustki indukowane przez CCK (15), co w kontekście naszej niedawnej pracy (4, 6. 8) sugerowałoby możliwą rolę dla Vamp8 również w egzocytozie podstawno-bocznej. Niemniej dokładna rola Vamp8 w każdej z tych grup egzocytotycznych nie została jednoznacznie wykazana. Tutaj badamy rolę VAMP8 w egzocytozie w każdej z tych ekscytogennych przedziałów trzustkowej komórki groniastej oraz w kontekście najczęstszej wyniszczającej i często śmiertelnej choroby, która dotyka tego typu komórki, alkoholowego zapalenia trzustki (21). Stosując myszy pozbawione VAMP8 (15, 20) i ED z submaksymalnym indukowanym Cch alkoholowym modelem zapalenia trzustki (6), ustalamy, że VAMP8 jest domniemanym pęcherzykiem SNARE (v-SNARE), który pośredniczy w egzocytozie podstawno-bocznej i w którym delecja VAMP8 łagodzi alkoholowe zapalenie trzustki . Co godne uwagi, odkryliśmy również, że VAMP8 jest najbardziej prawdopodobnym v-SNARE dla homotypowej fuzji ZG-ZG, ale nie jest egzocytozą wierzchołkową jako taką, ta ostatnia pozostaje nietknięta w komórkach groniastych z zarodkami VAMP8. Wyniki Eliminacja VAMP8 zmniejsza ciężkość alkoholowego zapalenia trzustki i związanego z tym uszkodzenia płuc. Chroniczne narażenie na EtOH przez 6-tygodniowe ED (22), a następnie serię 5-godzinnych iniekcji ip submaksymalnego Cch (Cch; 50 .g / kg / h) wywołuje łagodne ostre zapalenie trzustki (3, 6), naśladując ludzkie alkoholowe zapalenie trzustki . Częstym, ogólnoustrojowym powikłaniem ostrego zapalenia trzustki jest ostre uszkodzenie płuc (zespół niewydolności oddechowej dorosłych) (21, 23). W związku z tym zbadaliśmy, czy delecja VAMP8 wpłynęła na uszkodzenie trzustki (Figura i Tabela 1) lub uszkodzenie płuc (Figura 2 i Tabela 2) w tym modelu ED z dodatkiem Cch alkoholowego zapalenia trzustki. Tutaj porównaliśmy ED z dietą kontrolną (CD) w Vamp8 + / + (WT) i Vamp8. /. myszy poddano zastrzykom Cch lub iniekcjom soli fizjologicznej (jako kontrolę). Jako dalszą kontrolę zastosowano blokadę rozwoju zapalenia trzustki atropiną (Atp) plus podawanie Cch (zastrzyki 5 ip Atp 0,1 mg / kg / h przed iniekcjami IP Cch). Figura pokazuje reprezentatywną histologię, a Tabela określa ilościowo uszkodzenie trzustki (24, 25). W WT i Vamp8. /. myszy, ED i leczenie solą fizjologiczną wywoływały bardzo łagodny obrzęk i naciekanie leukocytów trzustkowych tkanek, które były bardziej widoczne w grupie WT. Gdy grupy otrzymujące ED były leczone za pomocą Cch, grupa WT rozwinęła umiarkowane do ciężkiego zapalenie trzustki charakteryzujące się obrzękiem miąższu, martwicą z obfitym naciekaniem leukocytów, martwicą tkanki tłuszczowej, zatkanymi naczyniami krwionośnymi w obrębie tłuszczu okołopłucnego i krwotokiem (24, 25). Chociaż wszystkie te histologiczne zmiany zapalenia trzustki były również obecne w Vamp8. /. myszy, te cechy były znacznie łagodniejsze w Vamp8. /. Grupa. Rycina 2 i tabela 2 przedstawiają histologię płuc (ryc. 2) i kwantyfikację (tabela 2). W grupie leczonej Cs z zastosowaniem WT ED stwierdzono znaczne zmiany zapalne obrzęku tkanki płucnej, naciekanie leukocytów, zatkane naczynia włosowate i krwotok. Te zmiany były dużo łagodniejsze w Vamp8. /. Grupa. W grupach CD histologia trzustki i płuc była jednolicie normalna. Figura Delecja VAMP8 zmniejsza nasilenie zapalenia trzustki wywołanego przez ED plus stymulację Cch. Histologia tkanek trzustki. WT i Vamp8. /. myszy karmiono parą z CD lub ED przez 6 tygodni, a następnie traktowano zastrzykami 5 ip soli fizjologicznej, Cch (50 .g / kg / h) lub Atp (0,1 .g / kg / h), a następnie Cch (50 yg / kg / h). Warto zauważyć, że grupa ED plus Cch wykazała wakuole cytoplazmatyczne, naciek leukocytów, krwotok i martwicę
[hasła pokrewne: endoproteza stawu biodrowego rodzaje, dieta wrzodowa jadłospis, dychawica krzyżówka ]