Terapeutyczna supresja inicjacji translacji moduluje chemosensitivity w mysim modelu chłoniaka czesc 4

Komórki HeLa inkubowano ze wskazanymi stężeniami FA i silvestrolu przez godzinę, dodając [35S] metioninę 10 minut przed końcem inkubacji. Szybkość włączania [35S] metioniny (35S) -Met) wyraża się w stosunku do komórek traktowanych nośnikiem (MeOH). Wyniki wyrażono jako średnie. SEM z 2 eksperymentów. (B) CBF wpływają przede wszystkim na syntezę białek in vivo. Continue reading „Terapeutyczna supresja inicjacji translacji moduluje chemosensitivity w mysim modelu chłoniaka czesc 4”

Terapeutyczna supresja inicjacji translacji moduluje chemosensitivity w mysim modelu chłoniaka ad

Wyniki te sugerują strategię mającą na celu zmianę wrażliwości na leki w nowotworach poprzez ukierunkowanie na inicjację translacji. Wyniki CBF są nowymi inhibitorami translacji zależnej od nasadki. W trakcie kampanii badania przesiewowego małych cząsteczek, mającej na celu identyfikację nowych inhibitorów translacji eukariotycznej (23), stwierdzono, że klasa naturalnych produktów, CBF (znana również jako rokwamaryny) wywiera silną aktywność hamującą. Członkowie tej rodziny są znani z cytotoksyczności (22, 24-28) i hamują syntezę białek (25, 29), ale ich cel (y) molekularny i sposób działania są nieznane. Zidentyfikowano dwa CBF, 1-O-formyloblafolinę (FA, znany również jako ropaglate 1-O-formylometylu) i silvestrol (22) (Figura 1A) i wykazano zależne od dawki hamowanie zależnej od kapelusza lucyferazy świetlika (FF) translacji, ale tylko umiarkowany efekt (~ 2-krotny spadek) na wewnętrznym, pośredniczonym przez HCV miejscu wiązania z miejscem wiązania rybosomu (HCV, w których pośredniczy IRESa) translacja lucyferazy Renilla (Ren) w teście translacji in vitro (Figura 1, B i C; w celu hamowania FF, odpowiednio około 4 ^ M i 0,3 (M dla FA i silvestrolu) (patrz Omówienie wyjaśnienia efektu translacji za pośrednictwem HCV IRES.). Continue reading „Terapeutyczna supresja inicjacji translacji moduluje chemosensitivity w mysim modelu chłoniaka ad”

Terapia nowotworowa u myszy poprzez celowanie antygenem w nowatorską lektynę typu C ograniczoną do DC ad 11

W przypadku badań znakowania in vivo skoniugowane z Alexa Fluor 488a anty-DNGR-1 lub mAb kontrolne dopasowane pod względem izotypu wstrzyknięto iv we wskazanej dawce, a tkanki przygotowano i analizowano po 16 godzinach. Przeciwciała swoiste dla ludzkiego CD3, CD14, CD19, CD56, HLA-DR, CD34, CD123 i CD16 zakupiono z BD, a CD1b / c i BDCA-3 pochodziły z Abcam. Ludzkie komórki jednojądrzaste zablokowano 100 ug / ml ludzkiej IgG (Sigma-Aldrich) i zabarwiono jak powyżej. Dane pozyskano na FACSCalibur (BD Biosciences) i analizowano za pomocą oprogramowania FlowJo (Tree Star Inc.). Immunoprecypitacja i Western blot. Continue reading „Terapia nowotworowa u myszy poprzez celowanie antygenem w nowatorską lektynę typu C ograniczoną do DC ad 11”

Terapia nowotworowa u myszy poprzez celowanie antygenem w nowatorską lektynę typu C ograniczoną do DC ad 5

Kowalentnie sprzężono anty-DNGR-1 lub dopasowane do izotypu kontrolne mAb do biotynylowanej pochodnej SIINFEKL, immunodominującego peptydu w odpowiedzi CTL ograniczonej H-2 Kb do białka OVA (SIINFEKLC-eahks-biotyna [S1]; patrz Metody ). Wszystkie koniugaty S1-mAb zawierały od do 1,2 cząsteczek biotyny (tj. 1. 1,2 peptydy) na przeciwciało i mogły być prezentowane na żywo, ale nie przez ustalone DC in vitro, co wskazuje, że nie są one podatne na proteolizę zewnątrzkomórkową i muszą być przetwarzane przez komórki w celu uwolnienia peptydu antygenowego (dane nie pokazane). Myszom wstrzyknięto dożylnie 2 .g koniugatu, a splenocyty odzyskano 16 godzin później, rozdzielono na podstawie ekspresji CD11c i testowano pod kątem zdolności do stymulacji komórek T OT-I jako odczyt dla prezentacji peptydu OVA (Figura 5A ). Continue reading „Terapia nowotworowa u myszy poprzez celowanie antygenem w nowatorską lektynę typu C ograniczoną do DC ad 5”