Po każdym z tych zabiegów następowało płukanie w buforze zawierającym chlorek wapnia, po czym na komórki nałożono odwapnione normalne połączone osocze zawierające różne stężenia aneksyny V; komórki nabłonkowe monitorowano następnie pod kątem koagulacji, jak opisano powyżej. Ponadto, czasy krzepnięcia komórek nabłonka inkubowanych z rekombinowaną aneksyną II zawierającą osoczę w stężeniu 4 .g na mililitr (dostarczonym przez doktora Hajjara) porównywano z komórkami inkubowanymi z osoczem zawierającym aneksynę V w tym samym stężeniu i komórki inkubowano z kontrolą bufora HEPES. Analiza statyst...
Identyfikowanie tylnych hormonów przysadki w płynach ustrojowych lub ekstraktach neurohypofizycznych było dotychczas częściowo osiągane przez stosowanie farmakologicznych stosunków siły lub półswoistej inaktywacji przez tioglikolan lub enzymy. Wytwarzanie surowic odpornościowych na oksytocynę i lizyno-wazopresynę skłoniło nas do przetestowania ich swoistości wobec lizyno-wazopresyny, argininy-wazopresyny, argininy-wazotocyny i oksytocyny. U szczurów znieczulonych etanolem, badano aktywność antydiuretyczną i wyrzucanie mleka dla każdej kombinacji peptyd-antyserum po 0, 30, 60 i 90 minutach inkubacji...
Dla testów lucyferazy in vivo, 293 komórek utrzymywano w pożywce DMEM uzupełnionej 10% FCS. Dzień przed transfekcją fosforanem wapnia komórki wysiano na 3 x 106 komórek / 10 cm naczynie. Po transfekcji pcDNA / Ren / HCV / FF, 293 komórek inkubowano przez 10 godzin z podłożem (MeOH) lub CBF przed zbiorem i zebrano 48 godzin po transfekcji. Testy lucyferazy przeprowadzono z zestawem do testu podwójnej lucyferazy zgodnie z instrukcjami producenta (Promega). Sondy do analizy Northern zostały wykonane przy użyciu zestawu Rediprime (Amersham). W przypadku testów wiązania aneksyny V komórki Jurkat utrzymywano...